一、植物简介
菜豆(Phaseolus vulgaris L.)又称四季豆、芸豆、扁豆等,分为食豆和食荚两种类型,菜豆在我国各省市均有栽培,种植范围十分广泛,是我国重要的粮食作物和蔬菜作物。菜豆能为人类提供丰富的蛋白质、碳水化合物、维生素及矿物质等,尤其嫩荚是人们喜食的蔬菜之一。
二、培养条件
增殖培养基为MSB5+6-BA5.0mg/L,生根培养基为1/2MSB5+IBA0.1mg/L。培养室环境温度为25℃,光照强度4 000lx,光周期为16h光照,8h黑暗。(将MS培养基中的有机成分换成B5培养基的有机成分,其他成分不变,缩写为MSB5)。
三、材料与方法
挑选籽粒均匀一致的菜豆种子,放置于玻璃容器中,用25%次氯酸钠处理20min,无菌水洗涤5-6次。
四、生长与分化叶子分割线
在超净工作台上,取生长5-6d的2叶1心的无菌苗,放置于灭菌后的培养皿中,切掉胚根及2片真叶,保留叶柄,作为外植体备用。将处理好的外植体的下胚轴部分插入增殖培养基中,插入深度0.5cm左右。而后,切取通过快繁获得的均匀一致的再生植株,插入生根培养基培养基中,进行生根培养。
五、炼苗移栽
先将生根后的组培苗开盖炼苗3-4 d,后将组培苗连瓶一起放置温室内炼苗3-4 d,炼苗结束后将组培苗取出,在水中除掉根部的培养基,尽量使再生根完整。移栽基质为草炭:蘑菇渣=1:1。将完整的组培苗移栽到移栽完的营养钵放置在有塑料薄膜覆盖的小拱棚内,移栽后前3d适当向拱棚内喷水,保证拱棚内相对湿度达100%,3d后逐渐放风直至除掉拱棚。